PCR analyse: hvad er det? Sådan tager du PCR-testen korrekt

Ikke så længe siden, en pålidelig,en meget følsom og hurtig metode til diagnosticering af forskellige infektionssygdomme hos en person. Denne metode kaldes "PCR analyse". Hvad er det, hvad vil dets essens, hvilke mikroorganismer det kan afsløre og hvordan man korrekt overlever det, vil vi fortælle i vores artikel.

Historie om opdagelse

Opfundet fremgangsmåden til polymerasekædereaktion (PCR)Amerikansk videnskabsmand Cary Myullis i 1983. I første omgang patenterede metoden til diagnose af firmaet "Cetus Corporation", hvor hans skaber arbejdede. Men i 1992 blev alle rettigheder og patenter solgt til firmaet "Hoffman-La Roche". Derefter viste det sig, at parallelle lignende undersøgelser blev udført og blev optaget af andre amerikanske biologer, såsom Alice Chen, David Edgar, John Treel. I 1980 behandlede sovjetiske forskere A. Slyusarenko, A. Kaledin og S. Gorodetsky dette problem. Derfor var det umuligt at bestemme den eneste rettighedshaver. Mange fremragende biokemister har bidraget til udviklingen af ​​polymerasekædereaktionsmetoden og patenteret deres innovationer. I øjeblikket udføres PCR-analyse overalt i specielt udstyrede laboratorier.

Kernen i PCR-diagnostikmetoden

PCR analyse: Hvad er det, og hvordan virker det? Essensen af ​​metoden er at øge i et specifikt mikrobiel medium ved hjælp af et særligt enzym af DNA-polymerase under kunstige betingelser. For at gøre dette skal du multiplicere det eksisterende DNA-materiale. I nærvær af en patogen mikroorganisme i prøven vil således mængden blive forøget gennem biokemiske laboratoriemanipulationer, og bakterien kan ikke detekteres i et mikroskop.

PCR analyse - hvad er det?

Hvordan udføres den materielle forskning?

Analysen kræver:

  • DNA-skabelonen;
  • primere der forbinder enderne af et fragment af materiale;
  • et termisk stabilt DNA-polymeraseenzym;
  • kemiske stoffer, der sikrer, at enzymer fungerer korrekt
  • en bufferopløsning, der er nødvendig for at skabe passende betingelser for vækst og udvikling af DNA-materiale.

    PCR-analyse 12

For at udføre PCR udføres 25-30 gentagelser bestående af tre trin: denaturering, glødning og forlængelse.

Til analyse af polymerasekædereaktionBrug en speciel enhed - en forstærker. Moderne udstyr giver dig mulighed for at indstille det nødvendige program til opvarmning og afkøling af rørene for at eliminere fejl under diagnosen.

Hvor anvendes diagnosen?

Metoden til polymerasekædereaktion anvendes på forskellige områder af medicin:

  • Retsforskere bruger det til at identificere genetisk materiale, såsom hår, spyt eller blod;
  • PCR blodanalyse hjælper med genotyping, for eksempel at detektere en individuel genetisk manipuleret reaktion på et specifikt lægemiddel;
  • ved hjælp af en sådan metode fastslå eksistensen af ​​familiebånd mellem mennesker;
  • Den mest populære PCR-metode er blevet i medicinsk diagnostik til definitionen af ​​forskellige infektionssygdomme.

Hvilke infektioner afslører PCR?

Så, medicin har længe og med succes brugt analysen af ​​PCR. Hvad er det, vi lærte allerede. Og hvilke patogener kan detekteres med det? Følgende infektionssygdomme diagnosticeres af PCR:

  • hepatitis A, B, C;
  • ureaplasmosis;
  • candidiasis;
  • klamydia;
  • mycoplasmose;
  • bakteriel vaginose;
  • infektiøs mononukleose;
  • trichomoniasis;
  • papillomavirusinfektion;
  • tuberkulose;
  • herpes infektion af 1 og 2 nd typer;
  • Helicobacter pylori infektion;
  • cytomegalovirus;
  • difteri;
  • salmonellose;
  • HIV infektion.

    PCR analyse for HIV

Desuden anvendes PCR metoder til diagnose af kræft.

Fordelene ved fremgangsmåden

Diagnose PCR har flere fordele:

  1. Høj følsomhed. Selv med kun få DNA-molekyler af mikroorganismen bestemmer PCR-analysen forekomsten af ​​infektion. Metoden vil hjælpe med kroniske og latente sygdomme. Ofte i sådanne tilfælde er mikroorganismen uudviklet på andre måder.
  2. Til undersøgelsen er ethvert materiale, såsom spyt, blod, sex, hår, epithelceller, egnet. Den mest almindelige er en blodprøve og et urogenitalt udstrygning på PCR.

    PCR: tag testen

  3. Det kræver ikke langtidsdyrkning. Automatiseret diagnostisk proces giver dig mulighed for at få resultaterne af undersøgelsen efter 4-5 timer.
  4. Metoden er næsten 100% pålidelig. Kun enkelte tilfælde af falsk negativt resultat blev registreret.
  5. Evnen til at identificere flere typerpatogener fra en enkelt prøve af materiale. Dette fremskynder ikke kun processen med at diagnosticere sygdommen, men reducerer også væsentligt materialomkostningerne. Ofte ordinerer lægen en omfattende PCR-analyse. Prøveprisen, der består af definitionen af ​​seks patogener, er ca. 1500 rubler.

Anbefalinger til forberedelse til analysen

For at resultaterne skal være pålidelige i PCR-undersøgelsen, skal analysen udføres som følge af anbefalingerne til den foreløbige forberedelse til diagnose:

  1. Før du giver op med spyt, skal du afstå fra at tage mad og medicin 4 timer inden du tager materialet. Skyl din mund med kogt vand straks før proceduren.
  2. Ovennævnte regler skal følges, når du tager en prøve fra den indre overflade af kinden. Efter skylning anbefales det, at der udføres en let hudmassage for at isolere udskillelsen af ​​kirtlen.
  3. Urin høstes normalt hjemme. For at gøre dette skal du gennemføre et grundigt toilet i kønsorganerne. Det er nødvendigt at samle 50-60 ml urin i en steril plastbeholder. For at sikre materialets renhed anbefales det, at kvinder sætter en tampon i vagina, og mænd trækker maksimalt huden fold. Du kan ikke tage materialet under menstruationsstrømmen.
  4. Til sæd er du nødt til at afstå fra at være seksuelHandler i 3 dage før indsamling. Læger anbefaler også at nægte at besøge saunaen og tage et varmt bad, drikke alkohol og krydret mad. 3 timer før testen, skal du afstå fra at vandre.
  5. Til levering af urogenitalt smear, for eksempel hvisEn analyse udføres på chlamydia PCR, både kvinder og mænd anbefales seksuel hvile i 3 dage. 2 uger før testen bør antibakterielle lægemidler ikke tages. I en uge skal du stoppe med at bruge intime geler, salver, vaginale suppositorier, sprøjter. 3 timer før testen, skal du afstå fra at vandre. Under menstruationen udføres ikke samlingen af ​​materiale, kun 3 dage efter afslutningen af ​​blodudladningen kan der tages et urogenitalt smør.

PCR under graviditet

I perioden med barnets forventning mange smitsommeSeksuelt overførte sygdomme er yderst farlige for fostrets normale udvikling. STD'er kan provokere intrauterin vækstretablering, abort eller for tidlig fødsel, medfødte misdannelser hos barnet. Derfor er det yderst vigtigt at videregive en tidlig PCR-test. Det er nødvendigt at indsende analysen ved registrering - op til 12 uger.

Analyse på chlamydia PCR

Hegnemateriale stammer fra livmoderhalskanalenved hjælp af en speciel børste. Proceduren er smertefri og udgør ikke fare for barnet. Normalt under graviditeten analyseres chlamydia ved PCR-metoden, såvel som ureaplasmose, mycoplasmose, cytomegalovirus, herpes og papillomavirus. Et sådant kompleks af undersøgelser hedder PCR-6.

PCR til hiv diagnose

I forbindelse med det faktum at fremgangsmåden til polymerasekædereaktionReaktionen er meget følsom over for ændringer i kroppen og diagnosens forhold, mange faktorer kan påvirke resultatet. Derfor er PCR-analyse for HIV-infektion ikke en pålidelig metode, dens effektivitet er 96-98%. I de resterende 2-4% af tilfældene giver testen falske positive resultater.

Men i nogle situationer uden PCR diagnostik af HIVikke at klare. Normalt administreres det til personer med et falsk-negativt ELISA-resultat. Sådanne indikatorer indikerer, at personen endnu ikke har udviklet antistoffer mod viruset, og de kan ikke detekteres uden en multipel stigning i antallet. Dette kan opnås ved at gennemføre en blodprøve ved hjælp af en PCR-metode.

Denne diagnose er også nødvendig for børn i det første år af livet, der er født af en hiv-positiv mor. Metoden er den eneste måde at pålideligt bestemme et barns status på.

PCR til diagnose af hepatitis

Polymerasekædereaktionsmetoden tilladerdetekterer DNA fra hepatitis A, B, C-virus længe før dannelsen af ​​antistoffer mod infektion eller udseendet af symptomer på sygdommen. Særligt effektiv er analysen af ​​PCR for hepatitis C, da i 85% af tilfældene fortsætter en sådan sygdom asymptomatisk, og uden rettidig behandling går det ind i et kronisk stadium.

PCR blodprøve

Tidlig påvisning af patogenet hjælper med at undgå komplikationer og langvarig behandling.

Omfattende PCR-undersøgelse

Kompleks PCR analyse: hvad er det? Denne testmetode polimezarnoy kædereaktion, der indbefatter bestemmelse samtidigt flere arter infektion: Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Gardnerella vaginalis, candida, trichomonas, cytomegalovirus, ureaplasma urealitikum, herpes 1. og 2. typen, gonoré papillomavirus. Prisen for denne diagnose spænder fra 2.000 til 3.500 rubler. afhængigt af klinikken, materialer og udstyr, såvel som af typen af ​​analyse: kvalitativ eller kvantitativ. Det, der er brug for i dit tilfælde - lægen beslutter. I nogle tilfælde, du simpelthen påvise tilstedeværelsen af ​​patogenet i andre, såsom HIV, den vigtige rolle, som kvantitativ titer spillet. benævnt "PCR-analyse af 12" i diagnosen af ​​alle de ovennævnte patogener undersøgelse.

Dekodning af analyseresultater

Afkodning af PCR-analysen er ikke vanskelig. Der er kun 2 skalaer af indikatoren - "positivt resultat" og "negativt resultat". Hvis et patogen er påvist, kan lægerne bekræfte sygdommens tilstedeværelse med 99% tillid og fortsætte med patientens behandling. I den kvantitative metode til bestemmelse af infektionen i den tilsvarende kolonne vil den numeriske værdi af de detekterede bakterier blive angivet. Kun en læge kan bestemme sygdomsgraden og foreskrive den nødvendige behandling.

Hvor skal man passere PCR analysen?

I nogle tilfælde, for eksempel ved bestemmelse afHIV-infektion ved PCR-metoden med et negativt resultat bliver det nødvendigt at foretage yderligere undersøgelser for at bekræfte resultaterne.

Hvor skal man tage analysen?

Hvor skal man indsende PCR-analysen: i statens polykliniske eller i et privat laboratorium? Desværre er udstyr og metoder i de kommunale medicinske institutioner ofte forældede. Derfor er det bedre at give fortrinsret til private laboratorier med moderne udstyr og højt kvalificeret personale. Derudover vil du i en privat klinik få resultater meget hurtigere.

I Moskva tilbyder mange private laboratoriergennemfører PCR analyse på forskellige infektioner. For eksempel udføres PCR-analyse i klinikker som Vita, Complex Clinic, Happy Family og Uro-Pro. Prisen for undersøgelsen er fra 200 rubler. til definitionen af ​​et patogen.

Det kan konkluderes, at diagnosen infektiøsPCR er i de fleste tilfælde en hurtig og pålidelig måde at påvise patogenet i kroppen på tidlige stadier af infektion. Men i visse tilfælde er det værd at vælge andre diagnosemetoder. Behovet for at gennemføre en sådan undersøgelse kan kun bestemmes af en specialist. Afkodning af PCR-analysen kræver også en professionel tilgang. Følg lægenes anbefalinger og giv ikke selv test, som ikke er nødvendige.

ønsket:
0
Urinalyse af Nechiporenko. Sådan monteres det
Generel analyse af urin. Hvordan man tager og hvad er normen?
Hvordan testes fækal okkult blod?
Hvor skal man tjekke for analyse? Hvad skal man gøre, når
Hvor korrekt at aflevere analysen af ​​afføring og om det er nødvendigt
Hvordan donerer blod til hormoner korrekt?
En blodprøve for HIV kan tages
Hvordan indsendes urintest korrekt?
Hvad vil urinanalysen fortælle (afkodning)
Topindlæg
op